抗原特异性T细胞对靶细胞的持久杀伤效应主要依靠记忆效应/中央记忆T细胞的长期存活、持久增殖特性。相比于耗竭型T细胞的短期活性爆发、快速耗竭失能特性，记忆型T细胞具有持久生存、静息后遇抗原快速扩增的能力。而且，记忆型T细胞具有特定的TCR，也就是说，相同的抗原肽MHC结合的效应型T细胞TCR与记忆型T细胞TCR是不同的。分离记忆型T细胞的TCR更有助于形成长效靶向抗原的CD8+ TCR-T细胞。
服务内容：
根据用户指定或提供的抗原，从HLA限制(用户指定)的PBMC中诱导活化出具有CD8+/CD62L+/抗原肽MHC四聚体阳性的T细胞。服务后交付：
- 含CD8+/CD62L+/抗原肽MHC四聚体阳性T细胞的PBMC混合细胞群
- CD8+/CD62L+/抗原肽MHC四聚体阳性T细胞的流式细胞检测原始数据，该原始数据含FCS文件，以及对照组流式检测数据(对照组为相同HLA限制性PBMC，经与抗原同批次处理，除未加抗原肽以外，所有其他处理条件\染色条件同抗原处理组)
服务质保：
经乙方确认可实施的订单，乙方可确保：
- CD8+/CD62L+/抗原肽MHC四聚体阳性T细胞占活CD8+ T细胞比例，刺激组与对照组FoldChange>2；
- 交付的含CD8+/CD62L+/抗原肽MHC四聚体阳性T细胞的PBMC混合细胞群总数>106
实测结果
记忆型抗原特异性T细胞活化的服务中，需要如下结果以保证抗原特异性活化：1、抗原特异性T细胞被四聚体标记；2、去除所有悬浮细胞后，仍可见未成熟的DC贴壁。
1、抗原特异性T细胞被四聚体标记
记忆型抗原特异性T细胞(以CD8+ T细胞为例)，需要同时为pMHC四聚体阳性和CD62L阳性。确认抗原肽具有诱导出抗原特异性T细胞的前提是须与无肽刺激的对照组相比较，该对照组使用的所有活化条件须与肽活化组一致，唯一不同的是未加抗原肽。
肽刺激组和对照组的主要差别在于pMHC四聚体阳性T细胞比例，肽刺激组高而对照组低（多数情况）。值得注意的是，对照组中仍然存在pMHC四聚体阳性细胞，其主要来源为与pMHC具有交叉反应TCR的T细胞。
2. 残留未成熟DC的荧光成像
成熟DC和T细胞均为悬浮状态，流式检测\分选(或单细胞测序)后，原培养体系中仅存贴壁细胞。此时，观察贴壁细胞状态可以判断DC分化过程中，是否出现高溶酶体状态。相比于成熟DC，未成熟 DC 的溶酶体含量更高，主要是因为它们处于“抗原捕获与储存”阶段：需要大量吞噬囊泡、内体/溶酶体样区室来容纳、暂存和处理持续摄入的抗原。 成熟 DC 则从“采样”转向“呈递”，溶酶体系统会发生重组，更多 MHC II 被转运到细胞表面，部分溶酶体相关区室转化为 MDL 等结构，因此不再以大量储存型溶酶体为主。
溶酶体内源性荧光物质最活跃、最常用的激发波长在 350 nm ～ 450 nm 之间可通过宽场荧光显微镜观察。
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