传统REP(rapid expansion protocol )扩增虽快，却“鱼龙混杂”——大量旁观者T细胞稀释了真正抗肿瘤的mTCR⁺细胞(murine TCR恒定区杂合细胞)。2024年，Rosenberg团队推出NeoExpand平台，通过新抗原肽刺激，实现选择性富集+干性保留，为实体瘤TCR-T疗法带来质的飞跃！
REP vs NeoExpand：一场“数量”与“质量”的对决
传统REP扩增（OKT3 + 饲养细胞）
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mTCR⁺细胞仅占 22.7% -
耗竭标志物 CD39↑ -
效应记忆T细胞（Tem）上调 -
干细胞样T细胞（Tscm/Tcm）显著下降 -
功能细胞被“稀释”，疗效受限
NeoExpand（新抗原肽刺激）
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mTCR⁺CD8⁺频率显著提升 -
CD39⁻CD69⁻干细胞样亚群最高 -
共受体阳性（CoR⁺）功能性T细胞富集 -
保留干性与增殖潜能 -
更接近理想TCR-T产品表型
最优方案：NeoExpand + OKT3 + IL-21
研究进一步优化组合策略，发现：
- OKT3→ 提升扩增倍数（数量）
- IL-21→ 保留干细胞样表型（质量）
- 异基因饲养细胞→ 进一步提升扩增总量
最终推荐方案：NeoExpand + OKT3 + IL-21 + 饲养细胞，兼顾选择性、扩增效率与干性维持。
参考文献：Kim SP, Levin N, Jo Y, Marquardt C, Yu Z, Levy L, et al. Selective expansion of T-cell receptor engineered T cells with increased stem-like phenotypes using neoantigen stimulation. Journal for ImmunoTherapy of Cancer. 2025;13:e013373. https://doi.org/10.1136/jitc-2025-013373
桂芎生物：赋能NeoExpand式精准TCR-T开发
Rosenberg 的 NeoExpand 依赖高纯度新抗原肽与精准T细胞分选。桂芎生物提供全链条支持，助您复现甚至超越该平台：
1. 抗原特异性T细胞扩增： 基于NeoExpand原理，用定制抗原肽刺激扩增高干性mTCR⁺T细胞
2. 微量pMHC复合物合成服务： 支持μg级新抗原-MHC合成，用于NeoSelect或验证
3. pMHC荧光四聚体合成以及筛选： 现货2000+种，快速分选mTCR⁺T细胞（替代REP非特异扩增）
4. 单克隆TCR测序： 从四聚体分选抗原特异性T细胞中配对TCR主克隆
5. 稳转原代TCR-T构建： 整合murine TCR恒定区的非病毒TCR稳转系统，更安全的临床前研究应用
6. 抗原肽-MHC亲和力高通量ELISA扫描服务： 高通量筛选最优新抗原表位，指导NeoExpand肽段设计
7. 工程化呈递细胞构建： K562-HLA系列，模拟体内抗原呈递，用于TCR功能验证
应用场景建议
- NeoExpand流程搭建：从新抗原筛选 → 肽合成 → T细胞扩增 → TCR-T构建；
- 替代REP非特异扩增：用pMHC四聚体分选mTCR⁺T细胞，直接扩增高纯度产品；
- CD4⁺ TCR-T优化：针对IL-21抑制CD4⁺扩增问题，开发专属pMHC-II四聚体以及相关扩增体系。
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